基礎(chǔ)檢驗學/腦脊液顯微鏡檢查

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臨床基礎(chǔ)檢驗學

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［方法學評價］一般工法。細胞少時應將腦脊液直接灌入FuchsRosenthal計數(shù)板，總體積為3。6μl中計當選，但愿現(xiàn)用改良牛鮑氏計數(shù)盤的誤差更大，所以應增加計數(shù)面積。如果標本內(nèi)細胞較多，可用生理鹽水或紅細胞稀釋液稀釋后再用人工計數(shù)，也可用血細胞分析儀進行計數(shù)。

當穿刺損傷血管導致血性禽脊應付或出血性腦血管病時，計數(shù)細胞總數(shù)已無意義，白細胞數(shù)亦須經(jīng)校正辦法有二：①估計值：即以紅細胞與白細胞數(shù)之比為700：1的關(guān)系估計白細胞數(shù)。也有學齡前者認為蛛網(wǎng)膜下腔出血的患者在發(fā)病3-4天內(nèi)進行腰穿刺時由于紅細胞破壞較早，應以每500個紅細胞比1個白細胞計數(shù)較為合適。②通過外周血紅細胞及白細胞數(shù)和腦脊液中紅細胞計當選出從血液中帶進腦脊液中白細胞數(shù)。以后者較為準確。

［參考值］成人腦脊液內(nèi)無紅細胞，白細胞極少，其參考范圍：腰池中為（0-10）×10⁶/L；腦室內(nèi)為（0-5）×10⁶/L，兒童為（0-15）×10⁶/L，新生兒為（0-30）×10⁶/L。如白細胞達（10-50）×10⁶/L為輕度增加，（50-100）×10⁶/L為中度增加，200×10⁶/L以上顯著增加。

（二）白細胞分類

［參考值］正常腦脊液中白細胞主要為單個核細胞。多為淋巴細胞及單核細胞。偶可見到軟腦膜和蛛網(wǎng)膜細胞、室管膜細胞、脈絡(luò)膜細胞等。

（三）細胞學檢查

［方法學評價］一般用腦脊液離心沉渣涂片，經(jīng)瑞特染色后用油鏡分類，但細胞形成常受影響。為了盡可能多地收集細胞和保持完好的細胞結(jié)構(gòu)，國內(nèi)一些單位已將細胞玻片離心沉淀儀運用于腦脊液細胞學檢查，提高了癌細胞的檢出率，在細胞染色技術(shù)上也采用我種方法。目前常用染色方法為MayGnimwaldGiemsa染色法。其客觀存在如吖啶橙熒光染色法適用于于對瘤細胞的辨認；非特異性酯酶染色法適用腦脊液中T細胞辨認；高碘酸雪夫染色法用以鑒別腺癌細胞和原淋巴細胞；過氧化物酶染色用以鑒別形態(tài)相似的幼稚細胞；脂類染色法用于鑒別脂類吞噬細胞；硝基四氮唑染色法用于鑒定成熟和幼稚的中性粒細胞等。

（四）寄生蟲學檢查

經(jīng)沉淀涂片認真尋找蟲卵、幼蟲等。

（五）顯微鏡檢查的臨床意義

1．中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性關(guān)病此時腦脊應付細胞病理學變化分三個不同時期：①急性炎性滲出期，呈粒細胞反應；②亞急性增殖期，呈激活淋巴細胞或單核-巨噬細胞反應；③修復其呈淋巴細胞反應。化膿性腦膜炎的急性期變化最突出，持續(xù)時間最長；此期腦脊液細胞數(shù)每微升可高達數(shù)千，經(jīng)中性粒細胞為產(chǎn)，當用抗生素治療后，腦脊液細胞數(shù)迅速下降。漬毒性腦炎亞急性期出現(xiàn)較早，持續(xù)時間較長，腦脊液中細胞數(shù)輕度增加，以淋巴細胞為主，在單純皰疹病毒性腦炎的腦脊液淋巴樣細胞中可發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)內(nèi)包涵體，結(jié)核性腦膜炎時其腦脊液細胞數(shù)可增加，但超過500×10⁶/L者較為罕見，在發(fā)病初期以中性粒細胞為主，但很快下降，由于患者多在發(fā)病數(shù)天后才來診治，因此首次腰穿時，腦脊液中中性粒細胞已趨下降而淋巴細胞為多。粒細胞、淋巴及漿細胞同時存在是結(jié)核性腦膜炎的特點。新型隱球菌性腦膜炎可在腦脊液中直接發(fā)現(xiàn)婚球菌，必要時用印度墨汁染色予以確診。

2．中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤腦脊液細胞當選可正?；蛏愿撸粤馨图毎麨橹?。腦脊液中能否找到腫瘤細胞取決于腫瘤位置及惡性程度、穿刺部位和采集標本的多少。同時也與檢查者技術(shù)水平有關(guān)，采用細胞正玻片離心沉淀儀可提高檢出率。腦脊液找到白血病細胞是白血病腦膜轉(zhuǎn)移的證據(jù)。

3．腦血管病腦脊液細胞學檢查有助于鑒別腦出血或腰穿損傷性出血。前者在早期病后數(shù)小時可見大量紅細胞和明顯中性粒細胞增多，2-3天內(nèi)達高峰，在腦脊液中可發(fā)現(xiàn)吞噬細胞，出血后數(shù)小時至第3天可出現(xiàn)含有紅細胞的吞噬細胞，5天后可見含鐵血黃素吞噬細胞。如為穿刺損傷性出血則不會有上述反應。

4．腦寄生蟲病不僅腦脊液細胞數(shù)升高，并可見嗜酸性粒細胞增多，約占白細胞的60%或更高。漿細胞增多為加一特點。如將腦脊液離心沉淀物全傾倒在玻片上，在顯微鏡下檢查可發(fā)現(xiàn)血吸蟲卵、阿米巴原蟲、弓形體、旋毛蟲的幼蟲等，甚至還可找至細粒棘球絳蟲的頭節(jié)或頭鉤。

5．紅斑狼瘡有時可在腦脊液中找到紅斑狼瘡細胞。

常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點見表15-2。

表15-2 常見中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的腦脊液檢查特點

	壓力（kpa）	外觀	蛋白質(zhì) 定性定量g/L	葡萄糖（mmol/L）	氯化物(mmol/L)	細胞總數(shù)及分類	細菌
正常人	臥位0.78-1.67	無色透明	-～±+0.2-0.4	2.5-4.4	120-130	(0-10)×10⁶/L多為淋巴細胞	無
化膿性腦膜炎	↑↑↑	混濁有凝塊	2+以上↑+～2+↑	↓↓↓	↓	顯著增加，以中性粒細胞為主增加，早期以中性粒細胞為主，其后以淋巴細胞為主	可發(fā)現(xiàn)至病菌找到抗酸性桿菌或結(jié)核培養(yǎng)陽性
結(jié)核性腦膜炎	↑↑↑	毛玻璃樣混濁有薄膜形成	↑+	↓↓	↓↓	增加以淋巴細胞為主	無
病毒性腦膜炎流行性乙型腦炎	↑ ↑	清晰或微混清晰或微混	↑+ ↑	正常	正常	增加早期以中性粒細胞為主期限后以淋巴細胞為主	無
新型隱球菌腦膜炎腦室及珠網(wǎng)膜下腔出血腦瘤	↑	清晰或微混	↑	↓	↓	增加以淋巴細胞為產(chǎn)	新型隱球菌
↑↑	血性	+～2+↑↑	↑	正常	無	增加以淋巴細胞為產(chǎn)
					增加以紅細胞為主

↑↑	清晰	↑+
				正常
腦脊髓	↑	清晰	+↑		正常	增加以淋巴細胞為主	無
梅毒					正常	增加以淋巴細胞為主	無