凝膠層析

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凝膠層析是按照蛋白質(zhì)分子量大小進(jìn)行分離的技術(shù)，又稱之凝膠過(guò)濾，分子篩層析或排阻層析。單個(gè)凝膠珠本身象個(gè)"篩子"。不同類型凝膠的篩孔的大小不同。如果將這樣的凝膠裝入一個(gè)足夠長(zhǎng)的柱子中，作成一個(gè)凝膠柱。當(dāng)含有大小不同的蛋白質(zhì)樣品加到凝膠柱上時(shí)，比凝膠珠平均孔徑小的蛋白質(zhì)就要連續(xù)不斷地穿入珠子的內(nèi)部，這樣的小分子不但其運(yùn)動(dòng)路程長(zhǎng)，而且受到來(lái)自凝膠珠內(nèi)部的阻力也很大，所以越小的蛋白質(zhì)，把它們從柱子上洗脫下來(lái)所花費(fèi)的時(shí)間越長(zhǎng)。凝膠中只有很少的孔徑可接受大的蛋白。因此，大的蛋白質(zhì)直接通過(guò)凝膠珠之間的縫隙首先被洗脫下來(lái)。凝膠過(guò)濾所用的凝膠孔徑大小的選擇主要取決于要純化的蛋白質(zhì)分子量。

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